请色谱柱前仔细阅读说明
Kromasil NH2色谱柱100A孔径Kromasil硅胶键合丙氨基团高效液相色谱柱适合糖类样品分析满足正相反相流动相条件操作反相条件时氨基键合相更容易发生水解应注意操作条件限制
色谱柱安装
1 出厂时色谱柱般保存正丙醇正庚烷乙酸乙酯(90:10)正相体系中接柱子前应异丙醇彻底洗整系统路反相条件需柱子进行渡活化1
2 连接时请色谱柱中提示箭头方进行安装
3 品牌色谱柱柱头规格存差异性需注意Peek接头否匹配出现漏液死体积增加建议更换新Peek线接头
二操作限制
1流动相
①常流动相甲醇乙腈等机溶剂水系缓溶液2(磷酸盐醋酸盐柠檬酸盐等)
②pH值3适范围:色谱柱pH值25~85间建议流动相pH值控制38间pH值越低氨基水解性越高pH值硅胶易溶解
③流动相应进行滤脱气处理
④流动相转换程中避免缓盐析出
2 样品
①采流动相组分相溶液溶解样品
②果样品中含溶物质请务必先通022μm045μm滤膜进行滤
3 流速压力
①色谱柱耐受压力400bar4
②延长色谱柱寿命常规分析柱(246径)建议流速022mlmin
4 温度5
①色谱柱060℃间安全延长色谱柱寿命建议温度40℃
②柱温应低流动相沸点30℃
三色谱柱活化洗
1色谱柱渡活化
色谱柱保存正相条件硅胶完全疏水反相时应述步骤进行色谱柱进行渡活化:
①异丙醇02mlmin流速洗色谱柱5h6
②梯度100乙腈1mlmin流速洗1h
③乙腈水(50:50)1mlmin流速洗1h
④流动相相应例乙腈水洗柱子1h
⑤换成流动相衡柱子7
2色谱柱洗
日常洗:
①80水81mlmin流速洗柱子1h流动相中缓盐
②梯度100甲醇乙腈洗30min9
③保存100乙腈中
生洗10:(段时间出现柱压柱效等问题)
①80水1mlmin流速洗柱子1h流动相中缓盐离子杂质
②梯度100甲醇乙腈1mlmin流速洗1h
③异丙醇02mlmin流速洗5h
④二氯甲烷1mlmin流速洗柱子1h
⑤异丙醇02mlmin流速洗5h
⑥100甲醇乙腈1mlmin流速洗1h
⑦保存乙腈中
特殊洗11:(分析糖类酸性样品出现保留柱效问题时)
①80水1mlmin流速洗柱子1h流动相中缓盐离子杂质
②510倍柱体积05氨水溶液乙腈(50:50)洗色谱柱
③立乙腈水(50:50)10mlmin流速洗色谱柱1h
④100乙腈洗保存
四色谱柱保存
洗干净色谱柱保存乙腈中果需长期保存建议色谱柱保存异丙醇中
注意事项:
1:新柱子渡活化非常重直接影响反相柱效重现性请严格渡活化方法进行活化
2:缓盐浓度应控制00102molL
3:pH值条件氨基电离形态导致保留分离效果差异需严格控制流动相pH值
4:避免突然改变压力超耐压长期
5:极端pH值条件应较低温度
6:异丙醇粘度较应低流速根需适提高流速05mlmin缩短时间
7:新色谱柱般需更长衡时间(般3—4h)直基线稳保留重现良
8:避免高例水相洗色谱柱
9:100机相洗时压力持续升高缓盐洗彻底应继续洗
10:时候生洗解决问题建议更换新色谱柱
11:仅作参考选择
北京振翔科技限公司
电话:01058896805
传真:01058896158
邮编:100039
址:北京市**区**路88号长银厦15A01
北京振翔科技限公司
文香网httpwwwxiangdangnet
《香当网》用户分享的内容,不代表《香当网》观点或立场,请自行判断内容的真实性和可靠性!
该内容是文档的文本内容,更好的格式请下载文档